食品中细菌的提取-沙门氏菌的检测

2021-07-15 09:24:00    admin2527 分享

导语：沙门氏菌病是指由各类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。沙门氏菌的病原体。属肠菌科，革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种（或菌株）。按其抗原成分，

一、沙门氏菌检测

沙门氏菌病是指由各类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。沙门氏菌的病原体。属肠菌科，革兰氏阴性肠道杆菌。已发现的近一千种（或菌株）。按其抗原成分，可分为甲、乙、丙、丁、戊等基本菌组。

实验过程
1、称取25g（mL）样品放入盛放有225mL缓冲蛋白胨水（BPW）的无菌拍打均质袋中，用拍打式均质器拍打1min-2min。如需调整pH值，用1mol/L无菌NaOH或HCL调pH至6.8±0.2
2、使用均质袋，可直接进行培养于36℃±1℃，培养8h~18h
3、轻轻摇晃培养过的样品混合物，取1mlL（可使用SOCOREX稀释移液器），转种于10mL亚硒酸盐胱氨酸増菌液SC内，于36℃±1℃培养18h~24h。同时取1mL，转种于10mLTTB内，于42℃±1℃培养
4、分别用接种环取增菌液1环，划线接种于一个BS琼脂平板于36℃±1℃培养40h~48h和一个HE琼脂平板于36℃±1℃分别培养18h~24h观察各个平板上生长的菌落

各个平板上生长的菌落
* BS琼脂 菌落为黑色有金属光泽、棕褐色 或灰色，菌落周围培养基可呈黑色或棕色；
* HE琼脂 蓝绿色或蓝色，多数菌落中.心黑色或几乎黑色；有些菌株为黄色，中.心黑色或几乎全黑色
* XLD 琼脂 菌落呈粉红色，或带不带黑色中.心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中.心，或呈现全.部黑色的菌落；有些菌株为黑色菌落，带或不带黑色中.心鉴定  采用的试剂进行鉴定。

二、拍打式均质器和稀释移液器

1、wiggens拍打式均质器

* 细菌萃取，经过拍打式均质后细菌没被损坏
* 容易插入均质袋, 在均质结束时，叶片并排停靠。密封系统防止液    体从均质袋顶部溢出
* 钢化玻璃制可视窗，易于观察（W 型）
* 工作时间1s-9min59s可调，或者选择连续工作模式免维护
* 无碳刷电机
 

2、socorex稀释移液器

移液器的金属吸嘴可以安装细而长的麦管吸头，所以该移液器可以从细长的容器中取样 ( 如拍打均质器的样品袋 )在细菌学的研究中，该移液器经常用来替代刻度玻璃移液管进行1:10稀释样品研究。

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